Hướng dẫn cách sử dụng đĩa thạch chứa môi trường TCBS Agar để kiểm tra nước ao nuôi
Bước 1: Lấy mẫu nước ở giữa hoặc đáy của ao cần kiểm tra.
Bước 2: Cho từ từ khoảng 2- 3 ml nước mẫu vào ngay trên bề mặt đĩa thạch TCBS, tránh dây nước lên thành đĩa.
Bước 3: Lắc nhẹ theo hướng xoay tròn để nước đươc trải đều trên bề mặt thạch.
Bước 4: Nghiêng đĩa về một phía, sử dụng khăn giấy hoăc vải khô thấm hết lượng nước dư rồi lau khô thành đĩa.
Bước 5: Đậy nắp đĩa lại, úp ngược. Sử dụng giấy gói đĩa thạch chứa môi trường TCBS Agar lại và bảo quản trong điều kiện nhiệt độ phòng khoảng 35 độ C.
Bước 6: Sau 18- 24 giờ, dài nhất là 48 giờ, mở đĩa ra, quan sát màu sắc và đếm số khuẩn lạc trên đĩa. Sau đó nhân với 4 để xác định tổng số khuẩn lạc/gam.
Bước 7: Khử trùng đĩa bằng Chlorine hoạt tính 0.5ppt (1% dung dịch thuốc tẩy) sau khi đếm.
Môi trường TCBS Agar chọn lọc vi khuẩn Vibrio như thế nào?
Căn cứ vào đặc điểm hình thái của lạc khuẩn để xác định chủng vi khuẩn Vibrio như sau:
| Vi khuẩn | Đặc điểm hình thái |
| Vibrio cholera | Khuẩn lạc vàng phẳng, đường kính 2-3 mm |
| Vibrio alginolyticus | Khuẩn lạc vàng lớn |
| Vibrio fluvialis, Vibrio vulnificus | Khuẩn lạc vàng hoặc trắng mờ |
| Vibrio parahaemolyticus | Khuẩn lạc không màu với trung tâm màu xanh |
| Pseudomonas, Aeromonas | Khuẩn lạc màu xanh nước biển |
| Enterobacteria or others | Khuẩn lạc trong suốt nhỏ |
Màu sắc lạc khuẩn trên môi trường TCBS Agar
Những lưu ý khi sử dụng đĩa thạch chứa môi trường TCBS Agar
– Khi sử dụng đĩa thạch TCBS, người thực hiện nên chọn các chất nuôi cấy đặc vì những loài Vibrio dễ chết đột ngột và môi trường này có để ngăn chặn được điều đó.
– Mẫu xét nghiệm tươi là tốt nhất, vì vi sinh vật này nhạy cảm với điều kiện khô, ánh sáng và pH acid. Nếu xử lý chậm thì nên sử dụng môi trường Cary-Blair để vận chuyển bệnh phẩm tốt hơn là môi trường vận chuyển có đệm glycerol.
– Không lấy khuẩn lạc ở môi trường TCBS để làm thử nghiệm oxydase.
Nguồn: DrTom
